ПЦР Плюс — время готовности от 12 часов.
Выявления SARS-CoV-2 в организме человека. Анализ берут из частей тела, со скоплением вируса, из носа или горла человека, берется мазок для исследования. Образец обрабатывают несколькими химическими растворами. Эти растворы удаляют все лишние вещества: белки и жиры, и из материала извлекают только присутствующую в нём РНК. Извлеченная РНК — это смесь генетического материала человека и РНК коронавируса, если она присутствует в образце.
При помощи определенного фермента в реакции обратной транскрипции РНК превращают в ДНК. Затем врачи добавляют дополнительные короткие фрагменты ДНК, комплементарные определенным частям транскрибированной вирусной ДНК. Эти фрагменты прикрепляются к заданным участкам вирусной ДНК, если вирус присутствует в образце. Некоторые из добавленных генетических фрагментов используются для построения цепей ДНК во время амплификации. Другие предназначены для построения ДНК и добавления к цепям маркерных меток, использующиеся в последствии для выявления вируса.
После этого смесь помещается в прибор для проведения ПЦР. Прибор выполняет циклы изменения температуры. В это время смесь нагревается и охлаждается, что запускает определенные химические реакции, которые создают новые точные копии заданных участков вирусной ДНК. Цикл многократно повторяется, чтобы продолжить копирование заданных участков вирусной ДНК.
В процессе создания новых копий вирусных участков ДНК, маркерные метки прикрепляются к цепям ДНК. Затем высвобождают флуоресцентный краситель, уровень которого измеряется вычислительным устройством прибора с выводом показателя в режиме реального времени на экран. Превышение этим показателем определенного уровня флуоресценции является подтверждением присутствия вируса.
Дополнительно
ПЦР метод в реальном времени имеет высокую чувствительность и точность, с его помощью можно поставить надежный диагноз. Но ПЦР в реальном времени нельзя использовать для выявления инфекций, появлявшихся в прошлом, что важно для понимания развития и распространения вирусов. Для выявления, отслеживания и изучения инфекций, появлявшихся в прошлом, особенно тех, которые могли развиваться и распространяться без симптомов, необходимо использовать другие методы, к примеру ИХЛ и ИФА на антитела IgG.
Подготовка к исследованию:
- Взятие мазков рекомендуется проводить не раньше 3-4 часов после последнего приёма пищи. SARS-Cov-2 живет внутри эпителиальных клеток. Для ПЦР-исследования необходим мазок с достаточным количеством инфицированного ДНК. В момент проглатывания еды эпителиальные клетки механически слущиваются пищевым комком с поверхности слизистой оболочки.
- Перед взятием мазков ни в коем случае нельзя использовать лекарственные средства для местного применения (капли, спреи и др). Впоследствии их применения количество вируса на слизистой оболочке снижается, что увеличивает вероятность получения ложноотрицательных результатов теста.
- Не чистить зубы перед взятием мазка. Главной целью на этапе взятия мазков для ПЦР-исследования, является получить биологический материал с достаточным количеством клеток, пораженных коронавирусом. Применение любых очищающих средств для полости рта снижает количество вируса в получаемом мазке.
- Отказаться от употребления алкоголя не менее чем за 2 дня до взятия мазка. Алкоголь содержит этиловый спирт, который также входит в состав многих антисептических средств, поэтому после приема алкоголя вероятность выявления коронавируса в мазке также может снизиться.